Изучение влияния пептидных биорегуляторов на возрастные изменения кожи в культуральной модели в формате 3D


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Проведено изучение действия инъекционного препарата для мезотерапии (Meso-Wharton Р199™) на культуры дермалънъх фибробластов, моделирующих состояние клеток в (зрелой) стареющей коже. Материал и методы. В работе использовали культуру фибробластов на 4-м пассаже (Р4), которая соответствовала по своим характеристикам фибробластам молодой кожи (контроль) и культуру фибробластов после 18-го пассажа (Р18), в которой все признаки старения дермальнъгх фибробластов (преобладание крупнъгх плащевидных и парусовиднъгх клеток, снижение темпов клеточного деления) бъгли хорошо заметны. Биоактивность оценивали по морфологии клеток, эпителио-мезенхимной пластичности и экспрессии характерных для фибробластов маркеров: цитокератина 19, эластина, а-гладкомышечного актина (aSMA), PCNA (маркера пролиферации), коллагенов типов I, III, IV и фибронектина. Результаты. При культивировании фибробластов Р18 с исследуемым инъекционным препаратом происходит формирование сфероидов, по срокам сопоставимое с формированием сфероидов из молодых фибробластов Р4. Из культуры фибробластов Р18, культивированных без препарата не происходит формирования полноценного сфероида, а наблюдается агрегация клеток и их постепенная гибель с некротической массой внутри агрегата. Присутствие в ростовой среде препарата стимулирует «омоложение» клеток и последующее восстановление мезенхимо-эпителиальной пластичности культивированных фибробластов за счет восстановленной способности синтезировать в достаточном для установления межклеточных контактов количестве компонентов внеклеточного матрикса (фибронектина и коллагенов), что влияет на способность формировать сфероиды. Культивирование образовавшихся сфероидов с препаратом стимулирует экспрессию эластина, коллагена IV типа, фибронектина, белка внеклеточного матрикса, поддерживающего упругость кожи, а поверхностные клетки активно экспрессируют цитокератин 19. Результаты исследования убедительно демонстрируют эффективность применения мезотерапевтического препарата для омоложения кожи.

Об авторах

К. В Кожина

ООО Центр восстановительной медицины

117997, г. Москва, Россия

Е. Н Волкова

ООО Центр восстановительной медицины

117997, г. Москва, Россия

И. Н Сабурина

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»; ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава РФ

125315, г. Москва, Россия

Сергей Георгиевич Морозов

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»

Email: biopharm@list.ru.
доктор мед. наук, профессор, член-корреспондент РАН, заместитель директора по научной работе и заведующий лабораторией Общей и перинатальной нейроиммунопатологии 125315, г. Москва, Россия

И. М Зурина

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»

125315, г. Москва, Россия

Н. В Кошелева

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»; ФГБОУ ВО Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Биологический факультет 125315, г. Москва, Россия

А. А Горкун

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»

125315, г. Москва, Россия

А. А Григорьева

ООО Центр восстановительной медицины

117997, г. Москва, Россия

Список литературы

  1. Смирнова И.О. Функциональная морфология старения кожи. Успехи геронтологии. 2004; 13: 44-51.
  2. Златопольский А.Д., Чубкина А.Н., Зайденберг М.А. Влияние ферментов фибронектина на пролиферативную активность фибробластов. Биохимия. 1989; 1: 74-9.
  3. Benedetto A.V. The environment and the skin aging. Clin. Dermatol. 1998; 16(1): 129-39.
  4. Ramata-Stunda A., Boroduskis M., Vorobjeva V., Ancans J. Cell and tissue culture-based in vitro test systems for evaluation of natural skin care product ingredients. Environ. Exper. Biol. 2013; 11: 159-77. http://in-cell.eu/uploads/files/file_14.pdf
  5. Maas-Szabowski N., Shimotoyodome A., Fusenig N.E. Keratinocyte growth regulation in fibroblast cocultures via a double paracrine mechanism. J. Cell Sci. 1999; 112(12): 1843-53.
  6. Trompezinski S., Berthier-Vergnes O., Denis A. Schmitt D, Viac J. Comparative expression of vascular endothelial growth factor family members, VEGF-B, -C and -D, by normal human keratinocytes and fibroblasts. Exp. Dermatol. 2004; 13(2): 98-105.
  7. Sorrel J.M., Baber M.A., Caplan A.I. Site-matched papillary and reticular human dermal fibroblasts ditter in their release of specific growth factors/cytokines and in their interaction with keratinocytes. J. Cell Physiol. 2004; 200(1): 134-45.
  8. Вялов С.П., Пшенистов К.П., Куиндоз П. Современные представления о регуляции процесса заживления ран. Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. 1999; 1: 49-58.
  9. Werner S., Krieg T., Smola H. Keratinocyte-fibroblast interactions in wound healing. J. Invest. Dermatol. 2007; 127(5): 998-1008.
  10. Sorrel J.M., Caplan A.I. Fibroblast heterogeneity: more than skin deep. J. Cell Sci. 2004; 117(Pt 5): 667-75.
  11. Zhao Y., Wang J., Yan X. Preliminary survival studies on autologous cultured skin fibroblasts transplantation by injection. Cell Transplant. 2008; 17(7): 775-83.
  12. Freedland M., Karmiol S., Rodriguez J., Normolle D., Smith D. Jr., Garner W. Fibroblast responses to cytokines are maintained during aging. Ann. Plast. Surg. 1995; 35(3): 290-6.
  13. Сабурина И.Н., Репин В.С. 3D-культивирование: от отдельных клеток к регенерационной ткани (К вопросу о феномене эпителиомезенхимальной пластичности). Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2010; 5(2): 75-86.
  14. Yamaguchi Y., Hearing V.J., Itami S., Yoshikawa K., Katayama I. Mesenchymal-epithelial interactions in the skin: aiming for site-specific tissue regeneration. J. Dermatol. Sci. 2005; 40(1): 1-9.
  15. Desmouliere A., Chaponnier C., Gabbiani G. Tissue repair, contraction the myofibroblast. Wound Repair Regen. 2005; 13(1): 7-12.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО "Эко-Вектор", 2016


 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».