Том 102, № 6 (2025)

Вирус Эбола (ВЭ) представляет постоянную угрозу для общественного здравоохранения с момента своего первого выявления в 1976 г. Проточная цитометрия (ПЦ) является одним из ведущих методов изучения болезни, вызываемой ВЭ.

Цель обзора — рассмотреть особенности иммунопатогенеза болезни, вызываемой ВЭ, изучение которых стало возможным благодаря использованию метода ПЦ.

При применении ПЦ и методов, технологической платформой для которых стала ПЦ (Luminex xMAP, CyTOF), выявлены факты иммунопатогенеза болезни, вызываемой ВЭ: ведущая роль цитотоксических лимфоцитов в защите от инфекции; дендритные клетки являются ранней мишенью ВЭ; элиминация NK-клеток на ранней стадии заболевания может быть причиной неспособности организма хозяина обеспечить устойчивый иммунный ответ; «уклонение» вируса от иммунного ответа. Летальный исход при болезни, вызываемой ВЭ, связан с аберрантным врождённым иммунным ответом и подавлением адаптивного иммунитета. Для реакции иммунитета при этом характерен «цитокиновый шторм». Иммуносупрессия при болезни, вызываемой ВЭ, проявляется низким уровнем циркулирующих цитокинов и потерей периферических Т-лимфоцитов. Ключевыми моментами для исхода инфекции являются время и кинетика репликации вируса и иммунного ответа. У выздоровевших после перенесённой болезни происходит активация Т-клеток, их пролиферация и формирование специфической противовирусной цитотоксичности, клеточного и гуморального иммунитета и иммунологической памяти. Установлено, что эффективным критерием оценки антиген-специфичного Т-клеточного иммунного ответа, формирующегося при введении вакцин против ВЭ, является доля полифункциональных Т-лимфоцитов. Рецептор фосфатидилсерина TIM-1 играет центральную роль в проникновении вируса в организм, его распространении и развитии «цитокинового шторма». Ингибирование межклеточной передачи ВЭ зависит от белка хозяина BST2/тетерина/CD317. Метод проточной вирометрии позволяет обнаруживать повреждённые при производстве вакцины против ВЭ вирусные частицы. Освещены вопросы пробоподготовки для ПЦ образцов, содержащих ВЭ.

Используя возможности ПЦ, ещё предстоит изучить врождённые и адаптивные реакции иммунной системы, имеющие отношение к патогенезу заболевания, вызываемого ВЭ, на уровне целого организма, клеток и молекул.

Введение. Кlebsiella pneumoniae является одним из наиболее значимых условно-патогенных микроорганизмов, вызывает широкий спектр инфекций у госпитализированных пациентов, характеризуется высокой способностью к накоплению генов антимикробной резистентности.

Цель: анализ фенотипического профиля резистентности к антимикробным препаратам (АМП) и молекулярных характеристик (гены резистентности и вирулентности) клинических штаммов K. pneumoniae, выделенных от пациентов с COVID-19, сравнительная оценка взаимосвязи между изученными генетическими и фенотипическими признаками.

Материалы и методы. Обследованы 102 пациента с COVID-19. Исследование мазков из носоглотки проводили классическим бактериологическим методом. Изучение фенотипической устойчивости к АМП выполнили при помощи диско-диффузионного метода. Проведено полногеномное секвенирование 9 изолятов K. pneumoniae с последующим биоинформатическим анализом генетического профиля резистентности к АМП и вирулентности.

Результаты. Проведённый анализ показал, что преобладающим механизмом устойчивости у исследованных штаммов K. pneumoniae является инактивация АМП (42,4%), что подчёркивает значимость ферментативной инактивации как основного механизма резистентности. Значительная доля генетических детерминант относится к эффлюксным насосам (36,3%), что также может свидетельствовать об их важности в обеспечении устойчивости к широкому спектру АМП. Меньшая доля генов ассоциирована с повреждением мишени АМП (9,1%), защитой цели АМП (6,1%) и уменьшением проницаемости к АМП (6,1%), однако их совместное присутствие указывает на комплексный характер устойчивости K. pneumoniae к АМП. Фенотипически все штаммы проявляли устойчивость как минимум к 2 АМП, при этом 67% исследованных изолятов были устойчивыми ко всем тестируемым АМП. Сравнительный анализ распределения генетических детерминант вирулентности и детерминант устойчивости к АМП выявил значимые различия (p < 0,001). Результаты корреляционного анализа продемонстрировали наличие значимой (p = 0,034) обратной корреляции между этими двумя показателями.

Выводы. Фенотипическая чувствительность K. pneumoniae к АМП при наличии генетических детерминант устойчивости может быть обусловлена сложным взаимодействием регуляторных механизмов, стабильности генетических элементов и условий окружающей среды. Полученные данные свидетельствуют о наличии выраженной тенденции к снижению количества генетических детерминант факторов вирулентности при увеличении генов устойчивости к АМП.

Введение. Проблема формирования биоплёнок возбудителями инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП), на инвазивных устройствах, применяющихся в медицинской практике, в настоящее время приобретает высокую актуальность. Существование микроорганизмов — возбудителей инфекций в виде биоплёнок создаёт большие проблемы в медицинской практике, наносит экономический ущерб и снижает качество оказания медицинской помощи. Формированием биоплёнок объясняются причины длительно протекающих инфекционных заболеваний, не поддающихся антибиотикотерапии. В сложившихся условиях одним из эффективных компонентов борьбы с бактериальными инфекциями, в том числе вызванными биоплёночными формами микроорганизмов, может явиться использование бактериофагов.

Цель работы — оценить эффективность применения литических бактериофагов для деструкции микробных биоплёнок на мочевых катетерах в экспериментальных моделях in vitro и in vivo.

Материалы и методы. В работе применяли микробиологические, морфологические и электронно-микроскопические методы. In vitro моделировали биоплёнки на поверхности мочевых катетеров с последующим добавлением бактериофагов. In vivo моделировали катетер-ассоциированную инфекцию мочевыводящих путей (КА-ИМП) у мышей, разделённых на опытную и контрольные группы, с последующим трансуретральным введением бактериофагов.

Результаты. В экспериментальной модели in vitro бактериофаги разрушали биоплёнки, вызывая лизис клеток и деструкцию экзополисахаридного матрикса. In vivo у мышей опытной группы наблюдался регресс течения КА-ИМП, подтверждённый морфологическими и бактериологическими исследованиями. Электронная микроскопия выявила деструкцию биоплёнок на 5 из 6 катетеров. В группе положительного контроля инфекция прогрессировала, в отрицательном контроле биоплёнки отсутствовали.

Выводы. Результаты проведённых экспериментальных исследований in vitro и in vivo продемонстрировали, что бактериофаги способны разрушать биоплёнки и могут быть эффективным средством для борьбы с ИСМП, вызванными микроорганизмами, формирующими биоплёнки.

Цель работы — изучение роли регуляторных В-лимфоцитов в регуляции воспалительного процесса в лёгких на фоне инфекции вирусом гриппа A/H1N1/WSN/1933.

Материалы и методы. Мышам CBA/N на следующий день после интраназального заражения вирусом гриппа A/H1N1/WSN/1933 переносили внутривенно В-клетки мышей CBA: B_reg — индуцированные in vitro под действием активаторов, содержание интерлейкин (ИЛ)-10⁺-регуляторных В-клеток высокое; B_contr — инкубированные in vitro без активаторов, содержание интерлейкин-10⁺-регуляторных В-клеток минимальное; B_PerC — выделенные В-клетки брюшной полости, без инкубации in vitro. На 4-е сутки после заражения оценивали гистологические изменения в лёгких, число IgM- и IgG-антителопродуцентов в лёгких и селезёнке, а также вирусную нагрузку в лёгких.

Результаты. Интраназальное заражение мышей CBA/N вирусом гриппа A/H1N1/WSN/1933 сопровождалось выявленными на 4-е сутки выраженными морфологическими изменениями лёгочной ткани, включая нарушение структуры тканей и клеточную инфильтрацию. Адоптивный перенос B_reg на следующий день после заражения ассоциировался со снижением выраженности гистологических признаков повреждения лёгких по сравнению с группой без переноса. Перенос B_contr и B_PerC также сопровождался уменьшением выявленных тканевых повреждений, однако эффект был менее выраженным, чем при переносе B_reg. Во всех группах с переносом B-клеток CBA отмечалось увеличение числа IgM- и IgG-антителопродуцентов в селезёнке и лёгких. При этом различий по показателю вирусной нагрузки в лёгких между сравниваемыми группами не выявлено.

Заключение. Выявленное предотвращение тяжёлого поражения тканей лёгких мышей CBA/N, заражённых вирусом гриппа A/H1N1/WSN/1933, при адоптивном переносе им индуцированных in vitro B_reg мышей CBA обусловлено комбинацией факторов: усилением иммунного ответа за счёт переносимых клеток и регуляторной активностью переносимых B_reg.

Введение. Лептоспироз — опасная зоонозная инфекция, резервуаром которой являются мелкие млекопитающие. Изучение генетического разнообразия возбудителей в популяциях животных критически важно для эпидемиологического надзора.

Цель работы — выявление и молекулярно-генетическая характеристика возбудителей лептоспироза у мелких млекопитающих (грызунов, насекомоядных, рукокрылых) на территории Северо-Западного федерального округа (СЗФО) России для оценки их видового разнообразия и потенциальной эпидемиологической значимости.

Материалы и методы. В период с 2023 по 2025 г. было собрано 88 образцов мочи от рукокрылых и образцы органов от 773 грызунов и насекомоядных, отловленных в Архангельской, Ленинградской, Псковской областях, Республике Карелия и Санкт-Петербурге. Генетические маркеры патогенных лептоспир детектировали с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени. Генотипирование положительных образцов проводили путём секвенирования по Сэнгеру фрагмента гена secY с последующим филогенетическим анализом.

Результаты. Генетические маркеры Leptospira spp. были обнаружены в 11,4% образцов мочи летучих мышей и в 2,5% образцов органов грызунов и насекомоядных. Наибольший уровень инфицированности отмечен в Санкт-Петербурге (3,2%) и Республике Карелия (3,0%). Филогенетический анализ выявил циркуляцию трех видов патогенных лептоспир: L. kirschneri (доминирующий вид), L. interrogans и L. borgpetersenii. У рукокрылых обнаружены генетически обособленные варианты, а один изолят (PV807621) показал лишь 95% сходство с референсными штаммами L. interrogans, что указывает на возможное обнаружение нового, адаптированного к летучим мышам геноварианта.

Заключение. Впервые показано, что популяции мелких млекопитающих СЗФО являются резервуаром для широкого спектра патогенных лептоспир. Обнаружение потенциально новых генетических вариантов у рукокрылых подчёркивает их важную роль в поддержании и эволюции возбудителей лептоспироза и требует учёта данного фактора при оценке эпидемиологических рисков.

Введение. Грипп может вызывать заболевания разной степени тяжести, иногда приводящие к госпитализации или смерти. Одной из наиболее перспективных стратегий, направленных на снижение уровня заболеваемости и предотвращение рисков развития тяжёлых последствий инфекции, является применение антител широкого спектра действия, обеспечивающих эффективную защиту от заражения сезонными штаммами.

Цель исследования — оценка протективной активности антитела CR9114 изотипов IgG1 и IgA1 при системном и местном введении в отношении экспериментальной гриппозной инфекции у мышей.

Материалы и методы. Препараты полученных рекомбинантных антител CR9114 изотипов IgG1 или IgA1 интраназально вводили мышам линии BALB/c в дозе 100 или 20 мкг за 24 ч до заражения вирусом гриппа A/Калифорния/07/09 (H1N1)pdm09 в дозе 10 МЛД₅₀ (профилактическая схема) и/или через 24 ч после инфицирования (терапевтическая схема). На протяжении 14 дней после заражения у животных оценивали динамику массы тела и проводили учёт летальности.

Результаты. Интраназальное введение антител изотипов IgG1 или IgA1 по лечебно-профилактической схеме приводило к снижению вирусной нагрузки в тканях респираторного тракта инфицированных мышей. При этом парентеральное введение IgG1 (но не IgA1) обеспечивало также снижение титра вируса в носовых ходах (но не в лёгких) мышей. Продемонстрировано, что профилактическое введение IgG1 или IgA1 обеспечивает полную защиту от летальной гриппозной инфекции.

Заключение. Интраназальное профилактическое введение человеческих нейтрализующих антител CR9114 изотипов IgG1 или IgA1 обеспечивает 100% выживаемость мышей при летальной инфекции вирусом гриппа A/Калифорния/07/09 (H1N1)pdm09. При этом Fc-фрагменты иммуноглобулинов разных изотипов, отвечающие за эффекторные функции, по-видимому, могут влиять на степень выраженности противовирусной защиты.